Polymerase-Kettenreaktion (PCR)
Die Polymerase-Kettenreaktion (PCR) ist ein Verfahren, das es ermöglicht, aus einer geringen Menge an Ausgangs-DNA
- Denaturierung: die doppelsträngige DNA
wird durch Erhitzung auf 95°C in Einzelstränge aufgetrennt - Hybridisierung: bei einer Temperatur von etwa 50-60°C binden Primer an die komplementäre DNA
-Sequenz - Elongation: eine DNA
-Polymerase verlängert die Primer am 3 ́-OH-Ende, wodurch eine doppelsträngige DNA entsteht. Dies geschieht bei 70°C - Durch die Wiederholung dieser Schritte können in kurzer Zeit viele Kopien der DNA
-Sequenz erzeugt werden
Die PCR kann verwendet werden, um DNA
Genom-Editierung
Bei der Genom-Editierung erfolgt eine Veränderung des Genoms lebender Organismen mithilfe von Endonukleasen.
- Ziel: Mutation oder entfernen/hinzufügen einer bestimmten DNA
-Sequenz - Verwendung der „Genschere“ CRISPR/CAS als Werkzeug
- CRISPR = ursprüngliche DNA
-Abschnitte im Genom von Prokaryoten - Cas = Endonuklease
- Restriktionsendonukleasen erkennen sehr spezifische Nukleotidsequenzen in doppelsträngiger DNA
und schneiden dort den Doppelstrang - Gene lassen sich somit durch CRISPR/Cas verändern, entfernen oder neu einfügen
- Einsatz kann in der Pflanzenzüchtung oder bei der Behandlung von Krankheiten erfolgen
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