Enzym- und Immunhistochemie

Prinzip: Aufbringen eines spezifischen Substrats auf den Gewebeschnitt; Umwandlung durch vorhandene Enzyme in ein unlösliches Farbreaktionsprodukt
Darstellung: Unter dem Mikroskop werden Lokalisation und – anhand der Färbeintensität – der Grad der Enzymaktivität sichtbar
Präparation: Meist Untersuchung an Frischgewebe (Gefrierschnitten), da Fixierung Enzyme inaktiviert; einige Reaktionen auch an fixiertem Gewebe möglich
Beispiele:
- Saure Phosphatase (lysosomale Aktivität)
- Succinat-Dehydrogenase (Mitochondrien, Myopathien)
- NADH- und ATPase-Färbungen am Muskelbiopsat (Muskelfasertypisierung)
- Acetylcholinesterase (Innervationsstörungen, z. B. Morbus Hirschsprung)

Prinzip: Nachweis von Antigenen im Gewebe durch spezifische Antikörper
Antikörpertypen:
- Polyklonale Antikörper: meist durch Immunisierung von Tieren gewonnen (heterogene Antikörperpopulation gegen verschiedene Epitope eines Antigens)
- Monoklonale Antikörper: ursprünglich durch
  Hybridomzellkulturen hergestellt, heute auch gentechnologisch produziert (spezifisch gegen ein einzelnes Epitop)
Nachweismethoden:
- Direkte Methode: Primärantikörper ist selbst mit einem Marker (z. B. Enzyme wie Horseradish peroxidase (HRP) oder Fluoreszenzfarbstoff) gekoppelt
- Indirekte Methode: Unmarkierter Primärantikörper + markierter Sekundärantikörper → Signalverstärkung
  Bsp.: ABC-Methode (Avidin-Biotin-Complex): Biotinylierter Sekundärantikörper bindet an Primärantikörper, anschließend bindet ein Avidin-Biotin-Enzym- Komplex → starke Signalverstärkung
Beispiele: Differenzierung von morphologisch ähnlichen Zelltypen anhand unterschiedlicher Antigene (z. B. endokrine Zellen), Tumordiagnostik, Subtypisierung von Leukämien und Lymphomen, Nachweis von Hormon- oder Wachstumsfaktor-Rezeptoren

Enzymhistochemie